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在葡萄育種中，雜交育種是葡萄品種改良的最常規(guī)方法，它在提升葡萄品質(zhì)、增強(qiáng)抗性和提高產(chǎn)量等方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。但葡萄本身存在花朵偏小且花序偏大的特點(diǎn)，每個花序中花朵數(shù)量偏多，平均達(dá)到500多個，雜交授粉工作是葡萄育種領(lǐng)域一項耗時而費(fèi)工的任務(wù)。為了獲得盡可能多的雜交果穗，需進(jìn)行大量授粉工作，而操作不當(dāng)會大幅降低雜交育種的效率。而適宜的人工雜交授粉技術(shù)可以減少工作量，同時還可以提高葡萄雜交育種效率，因此我們對葡萄人工雜交授粉技術(shù)進(jìn)行了改良和細(xì)化，以期提高葡萄雜交授粉技術(shù)及雜交后代的坐果率 。
一、材料和方法
1.1 親本的選擇
在葡萄雜交育種中親本的選擇、選配是十分重要的。親本的選配應(yīng)注意在育種目標(biāo)的前提下，目標(biāo)性狀要優(yōu)缺點(diǎn)互補(bǔ)。此次我們選用了自育優(yōu)系SP87133作為母本，是一個大粒無核紅色葡萄優(yōu)系，具有豐產(chǎn)、果穗大的特點(diǎn)，但是也有著色差、果皮薄易裂果的缺點(diǎn)。該雜交組合旨在選育出大粒、有香味、著色佳、抗性強(qiáng)的無核葡萄新品種。我們借助胚挽救技術(shù)，父本選擇優(yōu)系SP1015，它是一個紅色有核有玫瑰香味品種。
1.2 花粉的采集
首先選擇健壯的植株，一般在初花期，采集花穗，帶回實驗室，然后取下花冠和花藥，放在紙上晾干，待其充分干燥后用細(xì)紗網(wǎng)篩去花柄等殘渣，然后用研缽研磨花藥，用研缽研磨成細(xì)粉后倒入指形管中，用棉花塞好瓶口，外面貼上標(biāo)簽，放入盛有氯化鈣的干燥器內(nèi)，用封口膜封口后置于冰箱中低溫保存花粉。
1.3 去雄
在開花前1-2d或者是有個別小花開放時進(jìn)行，把花粉帽用鑷子或者手輕輕去掉，這樣能防止兩性花品種的自花受粉?；ǚ廴绻麤]有去干凈將再次去除，保證沒有花粉殘留，然后立即噴水進(jìn)行沖洗，抖動去除多余水滴后立即套袋，同時掛牌標(biāo)注品種和日期。
1.4 授粉
去雄后當(dāng)天即進(jìn)行授粉，采用四種方式：常規(guī)授粉、液體授粉、噴水后授粉及噴營養(yǎng)液后授粉。
常規(guī)授粉具體操作是：用鑷子夾取蘸有花粉的棉花，在柱頭上輕輕摩擦或抖動。
液體授粉懸濁液則由100g/L蔗糖、0.1g/L硼酸和3g/L花粉花藥混合物配制而成。為確保良好的授粉效果，花粉懸濁液最好在半小時內(nèi)完成噴灑；
噴水后授粉即授粉前用盛有清水的噴壺沖洗去雄后的花序，抖去水分后，在柱頭保持濕潤時授粉；
噴營養(yǎng)液后授粉則是先噴100g/L-1蔗糖加0.1g/L-1硼酸，再抖去多余營養(yǎng)液后進(jìn)行授粉。
1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計
在授粉后50d采集雜交果穗帶回實驗室進(jìn)行統(tǒng)計，數(shù)據(jù)用DPS數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析軟件，Duncan新復(fù)極差法進(jìn)行統(tǒng)計分析。
二、結(jié)果與分析
坐果率與種子數(shù)是反映葡萄雜交成功率與雜交質(zhì)量的主要指標(biāo)。從圖2表2 可以看出，噴水后授粉能顯著提高坐果數(shù)量，平均每穗達(dá)到43.33，是常規(guī)授粉坐果數(shù)量的1.71倍。對于單粒果實重量常規(guī)授粉和噴水后授粉一樣，相比之下，液體授粉和噴營養(yǎng)液授粉的果粒重量較小。
三、結(jié)論
雜交工作雖然簡單，但需要精細(xì)操作，每一步都關(guān)系到雜交育種的最終結(jié)果。從雜交親本選擇時要考慮各項原則，比如花粉的收集與貯藏時要注意防止花粉活力的喪失、去雄時注意柱頭的損壞，到雜交授粉時及時套袋防止自交、授粉時授粉的全面，以及雜交后植株的管理防止人為和自然損失，再到雜種果實的采集等。雜交工作的每一個步驟都可能影響最終育種的結(jié)果，我們此次試驗采用了四種授粉方式，結(jié)果表明在授粉前噴施清水可以顯著提高坐果率，液體授粉可能是操作技術(shù)的原因，并沒有取得預(yù)期效果，需要繼續(xù)研究驗證。
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