本研究針對(duì)寧夏葡萄酒產(chǎn)業(yè)中釀酒葡萄優(yōu)良種質(zhì)資源缺乏、品種相對(duì)單一、特色不突出等問(wèn)題,以銀川市葡萄、棗國(guó)家林木種質(zhì)資源庫(kù)穩(wěn)定保存40份釀酒葡萄種質(zhì)資源為材料,測(cè)定分析了穗質(zhì)量、粒質(zhì)量、果??v橫徑、種子數(shù)、還原糖、可滴定酸、總酚、單寧、花色甘含量等14個(gè)果實(shí)性狀指標(biāo),并應(yīng)用主成分分析法對(duì)果實(shí)品質(zhì)進(jìn)行了綜合評(píng)價(jià),為釀酒葡萄優(yōu)良品種的篩選及育種親本的選擇提供基礎(chǔ)。
一、材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
供試的40份釀酒葡萄種質(zhì)資源均來(lái)自寧夏農(nóng)林科學(xué)院綜合試驗(yàn)基地葡萄資源圃,其中包括17份白色品種,23份紅色品種 (表1)。所有資源材料于2014-2015年定植,籬架栽培,南北行向,株行距0.5m×3.0m,樹(shù)形為傾斜龍干形,采取短梢修剪,常規(guī)管理。
1.2 試驗(yàn)方法
果實(shí)成熟期在植株不同位置隨機(jī)采集典型果穗10個(gè),用直尺測(cè)量果穗長(zhǎng)度和寬度,用電子天平稱量穗質(zhì)量,然后在每個(gè)果穗的不同部位取20個(gè)果粒,共200粒,混勻后每30粒一組,共測(cè)定3組,計(jì)算粒質(zhì)量,用游標(biāo)卡尺測(cè)量縱、橫徑。在混勻的200粒果實(shí)中取50粒,用液氮冷凍后存放在-80℃超低溫冰箱,用于測(cè)定果實(shí)酚類物質(zhì)含量,其中總酚含量采用福林酚法測(cè)定,單寧含量采用福林-單寧斯法測(cè)定,花色苷含量采用pH示差法測(cè)定(白色品種不測(cè)定此項(xiàng))。未冷凍的果粒榨汁后用TD-35手持糖量計(jì)測(cè)定可溶性固形物含量,用 NaOH中和滴定法測(cè)定可滴定酸含量,用斐林試劑法測(cè)還原糖含量,并計(jì)算糖酸比。
1.3 數(shù)據(jù)分析
試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2007和DPSV 9.01軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
二、結(jié)果與分析
2. 1 果實(shí)性狀的變異分析
40份釀酒葡萄種質(zhì)資源14個(gè)果實(shí)性狀的變異系數(shù)在8.45%~52.73%(表1),變異系數(shù)較大的為花色苷含量(52.73%)、穗質(zhì)量(32.06%)、種子數(shù)(29.76%)、粒質(zhì)量(24.78%),表明這4個(gè)性狀在不同資源之間存在較大差異,變異系數(shù)較小的為可溶性固形物含量(8.45%)、還原糖含量(9.59%),果粒橫徑(9.16%)和縱徑(11.75%),表明這4個(gè)性狀變異幅度小,遺傳特性較為穩(wěn)定。
2.2 果實(shí)主要性狀的分布
2.2.1 穗質(zhì)量和粒質(zhì)量
40份釀酒葡萄種質(zhì)資源平均穗質(zhì)量主要分布在100~200g范圍內(nèi)(占82.5%),穗質(zhì)量大于300g的資源有1份,穗質(zhì)量小于100g的資源有1份。釀酒葡萄粒質(zhì)量基本呈偏正態(tài)分布,粒質(zhì)量主要集中在1.4~2.2g(占75.0%),粒質(zhì)量在2.6~3.0g或3.0~3.6g的資源分別有1份,粒質(zhì)量在1.0~1.4g的資源有5份。
2.2.2 還原糖和可滴定酸含量
還原糖含量主要集中在180~225g·L-1(占75.0%),還原糖含量低于180 g·L-1的資源有4份,還原糖含量高于255 g·L-1的資源有1份??傻味ㄋ岷恐饕植荚?.5~9.0g·L-1(占90.0%),可滴定酸含量<4.5g·L-1的資源有1份,可滴定酸含量>10.5g·L-1的資源有1份。
2.2.3 酚類物質(zhì)含量
40份釀酒葡萄種質(zhì)資源果實(shí)總酚含量主要分布在6.0~9.0mg·g-1(占70.0%),總酚含量小于6.0mg·g-1的資源占12.5%,總酚含量>11.0mg·g-1的資源有1份。果實(shí)單寧主要分布在3.0~5.0mg·g-1,占比為85.0%。單寧含量小于2.5mg·g-1的資源有1份,單寧含量大于5.0mg·g-1 的資源有3份。
23份紅色釀酒葡萄種質(zhì)資源果實(shí)花色苷含量主要分布在0.2~0.8mg·g-1,占比為87.0%?;ㄉ蘸啃∮?.2mg·g-1的資源有1份,花色苷含量大于1.2mg·g-1的資源有1份。
以果實(shí)還原糖、可滴定酸、總酚、單寧、花色甘含量5個(gè)內(nèi)在品質(zhì)性狀進(jìn)行特色品種的篩選,某一性狀所有種質(zhì)資源測(cè)定數(shù)據(jù)的平均值記為X,由于不同性狀變異系數(shù)差異較大,變異系數(shù)小于15%、15-35、大于35%的性狀分別按大于1.2X、1.5X和2X的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行選擇,篩選高花色苷資源1份,為‘羅馬4號(hào)’,高糖高酸高酚資源1份,為‘小芒森’。
2.3 果實(shí)品質(zhì)綜合評(píng)價(jià)
2.3.1 白色釀酒葡萄果實(shí)品質(zhì)綜合評(píng)價(jià)
對(duì)白色釀酒葡萄的8個(gè)主要果實(shí)性狀進(jìn)行主成分分析,提取了3個(gè)主成分,累計(jì)貢獻(xiàn)率達(dá)90.795%,說(shuō)明3個(gè)主成分反映了大部分的原始信息。載荷表示不同性狀指標(biāo)與提取的主成分之間的相關(guān)性,第1主成分貢獻(xiàn)率為55.969% ,總酚、單寧、還原糖、可溶性固形物、粒質(zhì)量與主成分1相關(guān)性較大,主成分1解釋了果粒大小及果實(shí)品質(zhì)的大部分指標(biāo)。第2主成分貢獻(xiàn)率為21.14%,可滴定酸、糖酸比與主成分2相關(guān)性較大,主成分2與果實(shí)酸含量有關(guān)。第3主成分貢獻(xiàn)率為13.686%,穗質(zhì)量在主成分3上載荷較高,主成分3與果穗大小有關(guān)。
表4反映了白色釀酒葡萄在3個(gè)主成分上的得分,‘小芒森’果粒小,還原糖、總酚、單寧含量高,在主成分1上得分最高;‘白姑娘’和‘西爾瓦’酸低、糖酸比高,在主成分2上得分較高;‘白玉霓’果穗大,在主成分3上得分最高。綜合評(píng)分排名前3位的種質(zhì)資源依次為‘小芒森’‘菲爾斯’‘雷司令’。
2.3.2 紅色釀酒葡萄果實(shí)品質(zhì)綜合評(píng)價(jià)
對(duì)紅色釀酒葡萄的9個(gè)性狀指標(biāo)進(jìn)行主成分分析,提取了4個(gè)主成分, 4個(gè)主成分累計(jì)方差貢獻(xiàn)率達(dá)87.834%。從表5可以看出,第1主成分貢獻(xiàn)率為46.986% ,載荷較高且為正的性狀有可溶性固形物、還原糖、可滴定酸、單寧,載荷較高且為負(fù)的性狀有粒質(zhì)量、糖酸比,主成分1解釋了果粒大小及果實(shí)品質(zhì)的大部分指標(biāo)。第2主成分貢獻(xiàn)率為16.713%,總酚含量在主成分2上載荷較高。第3主成分貢獻(xiàn)率為12.351%,穗質(zhì)量在主成分3上載荷較高,主成分3與果穗大小有關(guān)。第4主成分貢獻(xiàn)率為11.785%,主成分4與花色苷含量有關(guān)。
表6 反映了紅色釀酒品種在4個(gè)主成分上的得分,‘小味兒多’‘馬瑟蘭’‘赤霞珠685’果粒小,還原糖、可滴定酸、單寧含量高,在主成分1上得分較高;‘美樂(lè)’‘丹魄’‘小味兒多’在主成分2上得分較高,‘丹菲德’‘丹魄’在主成分3上得分較高,‘羅馬4號(hào)’花色苷含量高,在主成分4上得分最高。綜合評(píng)分排名前4位的種質(zhì)資源依次為 ‘小味兒多’‘馬瑟蘭’‘赤霞珠685’‘赤霞珠’。
2.4 釀酒葡萄種質(zhì)資源聚類分析
將釀酒葡萄主要果實(shí)性狀測(cè)試結(jié)果進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化轉(zhuǎn)換,采用歐氏距離離差平方和法進(jìn)行系統(tǒng)聚類(圖5),并對(duì)所分類群的性狀表現(xiàn)進(jìn)行了分析(圖6)。在歐式距離10.46處,將40份釀酒葡萄資源分為5類。第Ⅰ類包含5份資源,其特點(diǎn)是果粒小,還原糖、可滴定酸、酚類物質(zhì)含量高,糖酸比居中,綜合排名第1位的白色釀酒葡萄和排名前4位的紅色釀酒葡萄均被聚在此類群;第Ⅱ類包含14份資源,其特點(diǎn)是果粒中等,總酚、單寧含量較高,還原糖、花色苷含量居中,可滴定酸含量較低,糖酸比高;第Ⅲ類包含7份資源,其特點(diǎn)是果穗大,還原糖、可滴定酸、酚類物質(zhì)含量以及糖酸比居中;第Ⅳ類包含7份資源,其特點(diǎn)是果粒大,還原糖、可滴定酸、酚類物質(zhì)含量低,糖酸比高;第Ⅴ類包含7份資源,其特點(diǎn)是果粒中等,還原糖含量低、可滴定酸含量高、酚類物質(zhì)含量居中,糖酸比低。
三、討論與結(jié)論
變異系數(shù)一方面反映了不同葡萄種質(zhì)資源之間的性狀差異,另一方面也反映了葡萄在物種進(jìn)化過(guò)程中的保守性和遺傳的可塑性。本試驗(yàn)中調(diào)查的釀酒葡萄種質(zhì)資源的14個(gè)果實(shí)性狀變異系數(shù)存在很大差異,花色苷含量、穗質(zhì)量、種子數(shù)、粒質(zhì)量變異程度較高,說(shuō)明這4個(gè)性狀選擇潛力較大,可溶性固形物含量、還原糖含量、果粒橫徑和縱徑這4個(gè)性狀變異程度較小,表明其遺傳特性較為穩(wěn)定,選育潛力有限。釀酒葡萄果實(shí)內(nèi)在品質(zhì)性狀中,可滴定酸含量的變異系數(shù)遠(yuǎn)高于還原糖和可溶性固形物含量,表明葡萄的酸含量具有較豐富的遺傳基礎(chǔ),遺傳潛力大于糖含量。
葡萄糖酸代謝的調(diào)節(jié)以增糖降酸為主,但有研究表明高酒石酸含量會(huì)在一定程度上提高釀酒品質(zhì),酒石酸含量較高的品種會(huì)使葡萄酒的顏色、氧化性更加穩(wěn)定,同時(shí)因氣候變暖寧夏產(chǎn)區(qū)釀酒葡萄的酸含量已降至釀酒所需最低含酸量的臨界值,選擇高酸種質(zhì)很有必要。酚類物質(zhì)作為葡萄中重要的次生代謝產(chǎn)物,不僅影響葡萄酒的顏色、香氣和口感,還決定葡萄酒的許多生理活性功能。本試驗(yàn)對(duì)釀酒葡萄果實(shí)主要性狀的分布進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析,篩選高花色苷資源 ‘羅馬4號(hào)’,高糖高酸高酚資源 ‘小芒森’。
主成分分析和聚類分析被原來(lái)越廣泛的應(yīng)用于多樣品多指標(biāo)的分析和品質(zhì)性狀的綜合評(píng)價(jià)。本研究應(yīng)用主成分分析法對(duì)釀酒葡萄品質(zhì)進(jìn)行評(píng)價(jià),‘小芒森’‘菲爾斯’‘雷司令’‘小味兒多’‘馬瑟蘭’‘赤霞珠685’‘赤霞珠’7個(gè)品種綜合表現(xiàn)優(yōu)良,并通過(guò)聚類分析將40份釀酒葡萄種質(zhì)資源分為了5類,為釀酒葡萄優(yōu)良品種的應(yīng)用及育種親本的選擇提供參考。
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